摘要：目的對以葡萄籽油為主要原料組方的復方葡萄籽油進(jìn)行潤腸通便的功能研究。方法采用小鼠胃腸道及小腸推進(jìn)運動(dòng)，排便實(shí)驗模型，研究復方葡萄籽油潤腸通便的作用。結果在成功建立小鼠便秘模型的前提下、分別對試驗組小鼠灌胃三個(gè)不同劑量復方葡萄籽油（低、中、高）12d，結果表明：復方葡萄籽油低、中、高三個(gè)劑量組均能顯著(zhù)增加小鼠胃腸蠕動(dòng)功能，和便秘模型組比較、有極顯著(zhù)差異（P＜001）；各劑量組小鼠首次排便時(shí)間較便秘模型組明顯減少（P＜001），6h排糞便顆粒及重量、各劑量組均較便秘模型組增多（P＜001），復方葡萄籽油對小鼠體重增長(cháng)無(wú)不良影響。結論復方葡萄籽油具有較好的潤腸通便功能、并呈現一定的“劑量－效應”關(guān)系。
關(guān)鍵詞：復方葡萄籽油；潤腸通便；試驗研究

葡萄籽是釀造葡萄酒的付產(chǎn)物、葡萄籽中含有豐富的葡萄籽油及各種活性物質(zhì)，其已被廣泛運用于食品、保健品、藥品及化妝品中。本文首次對生長(cháng)于云南高原的葡萄籽油為主要原料組方的復方葡萄籽油進(jìn)行潤腸通便作用的研究，為拓寬葡萄籽的運用提供了科學(xué)數據。
1 材料與方法
11 材料
111 樣品：復方葡萄籽油由云南高原生物資源開(kāi)發(fā)有限公司提供、外觀(guān)呈黃褐色、液態(tài)油狀，有中藥特殊氣味，比重：088
112 溶劑：金龍魚(yú)牌玉米胚芽油，廣西防城港新海油脂工業(yè)有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)日期：20050829，淡黃色清亮透明無(wú)味的液態(tài)油，比重：085
113 復方地芬諾酯片：含鹽酸地芬諾酯25mg／片，焦作市博愛(ài)藥業(yè)有限公司生產(chǎn)、批號：04041602
114 墨汁：稱(chēng)取阿拉伯膠20g、加蒸餾水150ml，煮沸至溶液透明、加入活性炭粉10g、攪拌并反復煮沸3次，待溶液冷卻后加水定容到200ml，置于40C冰箱保存、用前搖勻。
115 小鼠：云南省天然藥物藥理重點(diǎn)實(shí)驗室提供二級ICR健康、成年、雄性小鼠、體重范圍：18－22g，動(dòng)物質(zhì)量合格證號：滇實(shí)動(dòng)證9805，小鼠顆粒飼料亦由該單位提供。
116 主要儀器：手術(shù)剪、眼科鑷、直鋼尺、1ml注射器、小鼠灌胃針、電子天平、平皿、小鼠籠具。
117 動(dòng)物房環(huán)境：普通級標準動(dòng)物房，溫度：19－210C、濕度：50－60％。
12 試驗設計
121 劑量設計和分組：以推薦人日常服用復方葡萄籽油量為30g／60kgbwd、初步設計相當于人體日常服用量10、20、30倍三個(gè)劑量組（復方葡萄籽油050、100、150g ／kgbwd）,另設空白對照、模型對照組，溶劑對照、溶劑模型對照，每個(gè)試驗設7組、兩個(gè)試驗共計14組。按體重隨機區組法分組、每組小鼠12只，試驗前各組小鼠體重差異無(wú)顯著(zhù)性（P＞005）。
122 受試物給予方法及時(shí)間：用玉米胚芽油將復方葡萄籽油配置成所需三個(gè)濃度，采用經(jīng)口灌胃的方式給予受試物，灌胃量為01ml／10gbwd。空白及模型對照灌胃等量蒸餾水、溶劑及溶劑模型對照灌胃等量玉米胚芽油，連續灌胃12d。
123 喂養：試驗期間、小鼠自由攝食及飲水，于試驗前、中期、結束稱(chēng)體重。
13 試驗方法及操作
131 小腸推進(jìn)試驗：灌胃12d后、各組小鼠禁食24h（期間自由飲水），模型對照、溶劑模型對照及葡萄籽油三個(gè)劑量組按5mg／kgbw劑量灌胃給予復方地芬諾酯，空白對照灌胃蒸餾水、溶劑對照灌胃玉米胚芽油。05 h后復方葡萄籽油三個(gè)劑量組灌胃給予含受試物的墨汁，溶劑對照及溶劑模型對照灌胃給予含玉米胚芽油的墨汁，陰性、模型對照組灌胃給予墨汁（各組墨汁活性炭含量均為5％），灌胃量為02ml／10gbw。20分鐘后立即頸椎脫臼處死小鼠，打開(kāi)腹腔分離腸系膜、剪取上端自幽門(mén)、下端至回盲部的腸管置于玻璃板上、將腸管自然擺成直線(xiàn)，分別測量從幽門(mén)至墨汁前沿和幽門(mén)至回盲部距離，計算小腸推進(jìn)率。
小腸推進(jìn)率（％）=幽門(mén)至墨汁前沿長(cháng)度（cm）／幽門(mén)至回盲部長(cháng)度（cm）×100
132 排便試驗：灌胃12d后、各組小鼠禁食24h（期間自由飲水），模型、溶劑模型對照及復方葡萄籽油三個(gè)劑量組按10mg／kgbw劑量灌胃給予復方地芬諾酯，空白對照灌胃蒸餾水，溶劑對照灌胃玉米胚芽油。05 h后復方葡萄籽油三個(gè)劑量組灌胃給予含受試物的墨汁，溶劑對照及溶劑模型對照灌胃給予含玉米胚芽油的墨汁，陰性、模型對照組灌胃給予墨汁（各組墨汁活性炭含量均為5％），灌胃量為02ml／10gbw。灌胃后、立即將小鼠單籠喂養，自由進(jìn)食及飲水，記錄每鼠首次排黑便時(shí)間及6h內排出糞便的總數及重量。
14 試驗數據處理：所有試驗結果均進(jìn)行統計學(xué)處理。使用華西醫科大學(xué)醫百醫統軟（PEMS軟件）中的方差分析、t檢驗
2 結果
21 復方葡萄籽油對小鼠體重的影響
給予復方葡萄籽油低、中、高三個(gè)劑量灌胃12d，各劑量組和對照組（空白、溶劑）比較、體重和增重無(wú)顯著(zhù)性差異（P＞005），見(jiàn)表1－2。

22 葡萄籽油對小鼠排便的影響
221 與空白對照組比較、模型對照組小鼠首次排便平均時(shí)間顯著(zhù)延長(cháng)、有高度顯著(zhù)性差異（P＜001），6小時(shí)排便粒數及重量明顯減少、有高度顯著(zhù)性差異（P＜001），說(shuō)明便秘模型建立。
與模型對照組比較、復方葡萄籽油高劑量組首次平均排便時(shí)間顯著(zhù)減少（P＜001），各劑量組6小時(shí)排便數量無(wú)明顯增加（P＞005），中、高劑量組6小時(shí)排出糞便重量明顯增加（P＜005、P＜001），并呈現一定劑量-效應關(guān)系（見(jiàn)表3）。

222 與溶劑對照組比較、溶劑模型對照組小鼠首次排便平均時(shí)間顯著(zhù)延長(cháng)、有高度顯著(zhù)性差異（P＜001），6小時(shí)排便粒數及重量明顯減少、有高度顯著(zhù)性差異（P＜001），說(shuō)明便秘模型建立。
與溶劑模型對照組比較、復方葡萄籽油各劑量組首次平均排便時(shí)間極顯著(zhù)減少（P＜001），各劑量組6小時(shí)排便數量及重量顯著(zhù)增加（P＜005、P＜001），并呈現一定劑量－效應關(guān)系（見(jiàn)表4）。

23 復方葡萄籽油對小鼠小腸推進(jìn)率的影響
231 與空白對照組比較、模型對照組小鼠墨汁推進(jìn)率顯著(zhù)降低（P＜001）、說(shuō)明便秘模型建立，各劑量組墨汁推進(jìn)率顯著(zhù)高于模型對照（P＜001）并呈現一定劑量－效應關(guān)系（表5）。

232 與溶劑對照組比較、溶劑模型對照組小鼠墨汁推進(jìn)率顯著(zhù)降低（P＜001）、說(shuō)明便秘模型建立，各劑量組墨汁推進(jìn)率顯著(zhù)高于溶劑模型對照（P＜001）、并呈現一定劑量－效應關(guān)系（表6）。

3 結論
以推薦人日常服用復方葡萄籽油量為30g／60kgbwd、初步設計相當于人體日常服用量10、20、30倍三個(gè)劑量組（復方葡萄籽油050、100、150g ／kgbwd）經(jīng)口灌胃給予小鼠12d、結果表明：
31 模型對照與空白對照比較、溶劑模型對照與溶劑對照比較，小腸平均推進(jìn)率顯著(zhù)降低（P＜001）；平均首次排便時(shí)間顯著(zhù)延長(cháng)（P＜001）、6h平均排便數量明顯減少（P＜001）、6h平均排便重量明顯降低（P＜001）；說(shuō)明在本試驗條件下、灌胃蒸餾水和灌胃溶劑（玉米胚芽油）的便秘模型均成功建立。
32 和空白對照組及溶劑對照組比較、復方葡萄籽油對小鼠體重增長(cháng)無(wú)不良影響。
33 三個(gè)劑量組小鼠小腸墨汁平均推進(jìn)率顯著(zhù)高于模型對照組（P＜001），說(shuō)明復方葡萄籽油具有促進(jìn)腸壁運動(dòng)的功能（見(jiàn)表5、6）。
34 表3可見(jiàn)、和模型對照組比較、復方葡萄籽油高劑量組小鼠平均首次排便時(shí)間明顯縮短（P＜001），中、高劑量組6h排便重量顯著(zhù)增加（P＜005、P＜001），但各劑量組6h排便數量未見(jiàn)增加（P＞005），說(shuō)明高劑量復方葡萄籽油具有促進(jìn)小鼠排便的功能。
35 表4可見(jiàn)、和溶劑模型對照組比較、復方葡萄籽油各劑量組小鼠平均首次排便時(shí)間明顯縮短（P＜001）， 6h排便數量及重量顯著(zhù)增加（P＜001），說(shuō)明各劑量組復方葡萄籽油均具有促進(jìn)小鼠排便的功能。
4 討論和建議
41 本次試驗受試樣品溶劑為玉米胚芽油，為排除溶劑對試驗結果的干擾，在按常規設置灌胃蒸餾水的空白及模型對照組外、另增設灌胃玉米胚芽油的溶劑及溶劑模型對照組同時(shí)進(jìn)行試驗，均獲得了陽(yáng)性結果，證實(shí)了受試物潤腸通便的功能與溶劑無(wú)關(guān)。
42 本次試驗發(fā)現、灌胃水和油的兩種便秘模型間首次排便時(shí)間6h排便數量和重量差異顯著(zhù)（P＜001），小腸墨汁推進(jìn)率亦有明顯差異（P＜005）。說(shuō)明不同的材料對小鼠排便的影響不同。建議空白對照及模型對照應灌胃和受試物相同的溶劑更為合理。
參考文獻
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