摘要：目的研究金絲小棗低聚糖對動(dòng)物機體免疫功能的影響。方法48只雌性昆明種小鼠，按體重隨機分為4組，一個(gè)溶劑對照組（蒸餾水）和三個(gè)金絲小棗低聚糖糖漿劑量組（125、250、500ml／kg bw），每組12只。各組動(dòng)物均每天定時(shí)灌胃（采用等體積灌胃法，02ml／10gbw），連續28天。選擇淋巴器官相對重量、脾臟抗體生成細胞數、半數溶血值（HC50）、脾淋巴細胞轉化試驗、遲發(fā)型變態(tài)反應試驗、碳粒廓清試驗和腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞試驗等免疫學(xué)指標和方法，試圖從體液免疫、細胞免疫和巨噬細胞吞噬功能等不同角度全面觀(guān)察金絲小棗低聚糖糖漿對動(dòng)物機體的免疫功能是否存在調節作用。結果1金絲小棗低聚糖糖漿對小鼠淋巴器官相對重量無(wú)明顯影響；2中、高劑量組小鼠的足跖腫脹度明顯增加，但淋巴細胞的增殖能力各組動(dòng)物均無(wú)明顯改變；3中、高劑量組小鼠的脾臟抗體生成細胞數對照組比較有顯著(zhù)性差異，三個(gè)劑量組的HC50均表現明顯增加；4中劑量組小鼠的碳粒廓清指數和腹腔巨噬細胞吞噬指數均較對照組明顯提高。結論金絲小棗低聚糖糖漿在一定劑量范圍內能提高正常昆明種小鼠的體液免疫、細胞免疫和巨噬細胞吞噬功能。機理可能與機體腸道免疫系統有關(guān)，主要是激活了腸相關(guān)淋巴組織所致。
關(guān)鍵詞：金絲小棗低聚糖；小鼠；細胞免疫功能；體液免疫功能；巨噬細胞吞噬功能

棗是我國傳統的補益食品，糖類(lèi)、膳食纖維、維生素和礦物質(zhì)含量均比較豐富［1］，特別是金絲小棗中各種礦物質(zhì)的含量和比值均接近人體需要［2］，營(yíng)養價(jià)值很高。此外，有研究表明，大棗具有抗疲勞、抑制腫瘤、抗氧化等保健功能［3］-［5］，但對棗中各種功效成分與機體健康關(guān)系的研究目前報道較少。本研究即以河北省滄州地區出產(chǎn)的金絲小棗為原料制得棗低聚糖糖漿，通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗的方法，全面地研究了金絲小棗低聚糖對實(shí)驗動(dòng)物機體免疫功能的影響。
1 材料與方法
11 樣品：
金絲小棗低聚糖糖漿由本實(shí)驗室自制。外觀(guān)為深褐色粘稠狀液體，使用時(shí)用蒸餾水直接稀釋。
本試驗設三個(gè)劑量組：125、250、500ml／kg bw。
12 實(shí)驗動(dòng)物：
選用河北醫科大學(xué)實(shí)驗動(dòng)物學(xué)部提供的清潔級雌性昆明種小鼠，許可證號為SCXK（冀）2003-1-003，體重18-22g，按體重隨機分組。
13 補體：由北京大學(xué)醫學(xué)部提供。
14 試劑：
綿羊紅細胞（SRBC）采自健康成年綿羊；印度墨汁購于北京化學(xué)試劑公司；瓊脂糖由軍事醫學(xué)科學(xué)院進(jìn)口分裝。其它均為實(shí)驗室分析純試劑。
15 方法
151 體液免疫及細胞免疫功能檢測：采用雷志明等推薦的方法［6］稍作改動(dòng)后進(jìn)行實(shí)驗。
本實(shí)驗選用雌性昆明種小鼠48只，隨機分為四組，每組12只；受試物設三個(gè)劑量組和一個(gè)陰性對照組（蒸餾水），各組動(dòng)物均每天定時(shí)灌胃（采用等體積灌胃法，02ml／10gbw），連續28天，第24天以2%的綿羊紅細胞（SRBC）第一次免疫動(dòng)物（腹腔注射02ml），27天第二次免疫動(dòng)物（足跖部位皮下注射20%SBRC20ul），第28天進(jìn)行下述試驗。
①淋巴器官相對重量：用臟／體比值表示。
②遲發(fā)型變態(tài)反應（DTH）：采用足跖增厚法。
③淋巴細胞轉化試驗：MTT法。
④脾臟抗體生成細胞數（PFC）檢測：采用Jerne改良玻片法。
⑤血清溶血素測定：采用半數溶血值（HC50）法。
152 巨噬細胞吞噬功能檢測［7］：
1521 小鼠碳粒廓清試驗
本實(shí)驗選用雌性昆明種小鼠48只，動(dòng)物分組、劑量、灌胃時(shí)間及方法均同151（不免疫動(dòng)物）。
1522 腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞試驗：采用半體內法。
本實(shí)驗選用雌性昆明種小鼠48只，動(dòng)物分組、劑量、灌胃時(shí)間及方法均同151（不免疫動(dòng)物）。
16 數據處理
采用方差分析進(jìn)行統計處理。
2 結果
21 淋巴器官相對重量（見(jiàn)表1）
結果顯示，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的金絲小棗低聚糖28天，脾臟和胸腺的臟器系數三個(gè)劑量組與對照組相比較均無(wú)顯著(zhù)性差異。
22 金絲小棗低聚糖對小鼠免疫功能的影響
221 細胞免疫功能
結果見(jiàn)表2。經(jīng)口給予小鼠不同劑量的金絲小棗低聚糖28天，其中、高劑量組的足跖腫脹度與對照組比較有顯著(zhù)性增加；但對淋巴細胞的增殖能力無(wú)明顯影響。

222 體液免疫功能
結果見(jiàn)表3。經(jīng)口給予小鼠不同劑量的金絲小棗低聚糖28天，其中、高劑量組的脾臟抗體生成細胞數、HC50與對照組比較有顯著(zhù)性差異。說(shuō)明金絲小棗低聚糖在本試驗所設置的劑量范圍內，能一定程度地增強小鼠的體液免疫功能。

223 巨噬細胞吞噬功能
結果見(jiàn)表4。經(jīng)口給予小鼠不同劑量的金絲小棗低聚糖28天，碳粒廓清試驗和腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞試驗的中劑量組與對照組比較均差異顯著(zhù)。說(shuō)明金絲小棗低聚糖在本試驗所設置的劑量范圍內，能一定程度地增強小鼠機體的巨噬細胞吞噬功能。

3 討論
本研究結果表明，金絲小棗低聚糖糖漿在25～50ml／kg bw的劑量范圍內能較全面的提高正常動(dòng)物機體的免疫功能。低聚糖為不可利用碳水化合物，在消化道中不被消化吸收，因此，其提高機體免疫功能的機理可能與腸道免疫系統有關(guān)，主要是激活了腸相關(guān)淋巴組織所致［8］，低聚糖能增加腸系膜淋巴結中分泌抗體的量［9］。未消化的金絲小棗低聚糖進(jìn)入大腸后，激活腸淋巴細胞，淋巴細胞通過(guò)腸系膜淋巴結擴散，經(jīng)胸導管入血，然后再回到粘膜固有層，從而改善機體的免疫功能。此外，其提高機體免疫功能的機理還可能與其刺激腸道益生菌，主要是雙歧桿菌的生長(cháng)繁殖有關(guān)。研究表明，雙歧桿菌可提高機體的抗體水平，提高巨噬細胞的吞噬活性［10］。雙歧桿菌在體外能促進(jìn)腸黏膜淋巴細胞產(chǎn)生大量的抗體［11］。相關(guān)研究將在后續工作中進(jìn)行。
經(jīng)本實(shí)驗室檢測，金絲小棗低聚糖糖漿中含有濃度相對較高的環(huán)磷酸腺苷（cAMP），含量為198ug／g。阮暉等［12］研究表明，動(dòng)物體內cAMP對外來(lái)病毒的攻擊有一定的抵抗作用，從而說(shuō)明機體抵抗力的增強與cAMP有一定的關(guān)系。cAMP作為激素的介導物——第二信使，參與體內各種酶及生長(cháng)因子的代謝過(guò)程，在生命活動(dòng)中起著(zhù)重要的調節作用。除了與機體的免疫功能有關(guān)外，還能促進(jìn)心肌細胞的活性，利于神經(jīng)傳導，促進(jìn)物質(zhì)的吸收，控制細胞惡變，等。因此，進(jìn)一步開(kāi)發(fā)cAMP含量高的保健食品應該成為食品行業(yè)的一個(gè)發(fā)展方向。
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