李雅慧 董詩(shī)源 余超 姜雨
(國家食品藥品監督管理局保健食品審評中心,北京,100061)
摘要:葉黃素是一種屬于類(lèi)胡蘿卜素的黃色化學(xué)色素,具有增色和營(yíng)養的雙重功效。主要存在于綠葉菜、桔黃色蔬菜、桔黃色水果以及蛋黃中,萬(wàn)壽菊的干花瓣中含有高濃度的葉黃素。在人體內,葉黃素存在于血漿和眼睛的黃斑區。主要功能是抗氧化及防止視力退化和失明癥,此外葉黃素還能預防心血管疾病、心肌梗死、肺癌和對皮膚具有保護作用。
經(jīng)口急性毒性實(shí)驗和對眼及皮膚的刺激性、致癌性和遺傳毒性試驗表明,葉黃素在人體內具有抗癌、抗基因突變、抗誘變等作用,且無(wú)毒無(wú)害。
葉黃素的提取方法包括有機溶劑浸提法、干燥法、高速逆流色譜技術(shù)、膜分離技術(shù)、微波提取法、萃取法、CO2超臨界萃取法等。
此外,本文還對葉黃素的生物利用率、分布、代謝和排出以及安全攝入量、在國內外的批準和使用現狀做了詳細的介紹。
關(guān)鍵詞:葉黃素;功能;安全評價(jià);提取;生物利用率;安全攝入量
葉黃素是一種屬于類(lèi)胡蘿卜素的黃色化學(xué)色素,具有增色和營(yíng)養的雙重功效。分為酯化葉黃素和非酯化葉黃素兩種形式,酯化葉黃素是葉黃素的一種類(lèi)型,其主要化學(xué)實(shí)體是葉黃素二棕櫚酸酯。1g酯化葉黃素在腸道內會(huì )水解為05g非酯化的葉黃素。在自然界中葉黃素主要存在于綠葉菜、桔黃色蔬菜、桔黃色水果以及蛋黃中,萬(wàn)壽菊的干花瓣中含有高濃度的葉黃素[1]。葉黃素和其他類(lèi)胡蘿卜素的一個(gè)重要區別是葉黃素并不是維生素A原,人體內自身也不能夠合成,需要完全依賴(lài)飲食攝取。
在人體內,葉黃素存在于血漿和眼睛的黃斑區[2],是人眼中唯一存在的兩種胡蘿卜素之一。他的主要作用是抗氧化,其次,作為光保護成分,能夠有效地濾除陽(yáng)光中導致視網(wǎng)膜損傷的藍光[3],防止視力退化和失明癥。除了對眼睛的健康起重要的作用外,葉黃素是預防心血管疾病、心肌梗死、肺癌的重要營(yíng)養素。由于對過(guò)量紫外線(xiàn)的吸收,葉黃素對皮膚還有保護作用。
1 葉黃素的安全性評價(jià)
11 經(jīng)口急性毒性實(shí)驗和對眼及皮膚的刺
激性經(jīng)口給予葉黃素375g/kg BW對大鼠不產(chǎn)生毒性;01g葉黃素對成年新西蘭白兔眼眼無(wú)刺激;葉黃素對皮膚的刺激性在非刺激性到刺激性非常低之間[4-5]。
12 致癌性和遺傳毒性
各種長(cháng)期研究并沒(méi)有發(fā)現葉黃素補充劑具有致癌性。流行病學(xué)研究也未發(fā)現食用富含葉黃素的膳食會(huì )增加患癌癥的風(fēng)險,而且絕大多數研究都發(fā)現食用富含葉黃素的膳食具有防癌作用。動(dòng)物研究也證明了葉黃素具有防癌作用。嚙齒動(dòng)物食用葉黃素的相關(guān)研究證明了葉黃素能夠減輕化學(xué)物質(zhì)引發(fā)的癌癥癥狀[6-8]。
從萬(wàn)壽菊花中提取的1μg純的葉黃素對大鼠肝細胞來(lái)說(shuō)不但不具有基因毒性,反而會(huì )降低乙基亞硝胺所引發(fā)的基因毒性。所有研究都沒(méi)有發(fā)現葉黃素具有致突變性,有幾項研究的報告指出了葉黃素和其他已知誘變劑一起使用時(shí)具有明顯的抗誘變性和抗基因毒性的活性[9]。
人類(lèi)臨床研究表明了長(cháng)期使用葉黃素酯具有很好的耐受性。期限從84天到3年的數項臨床研究表明了18-60mg/天的葉黃素酯用量是安全的。18項人體臨床研究中有3項報道的唯一副作用為胡蘿卜素黃皮病,這種病對健康而言并不具危險性,而且病情具有逆轉性[10]。
2 葉黃素的提取方法
21 有機溶劑浸提法
葉黃素在中性條件下難溶于水,在乙醇中溶解度較大,因此,常選用乙醇作溶劑在堿性條件下提取葉黃素。常用的有機溶劑還有丙酮、石油醚等。用有機溶劑從萬(wàn)壽菊花中提取葉黃素的方法如下:將采摘的萬(wàn)壽菊花經(jīng)發(fā)酵、干燥、粉碎,用石油醚提取。提取液呈棕黃色。提取液加熱蒸發(fā)提取到葉黃素半成品,蒸汽經(jīng)冷卻得到再生石油醚。半成品經(jīng)真空脫臭和用乙醇脫去殘余石油醚,同時(shí)用氫氧化鉀使半成品進(jìn)行部分皂化得到產(chǎn)品。所得到的產(chǎn)品純度高、色調正、調色穩定,且無(wú)三廢排放,環(huán)境保護條件好[11]。
22 干燥法
目前,國外研究成功一種新型轉桶式干燥機[12],用以干燥和捶擊萬(wàn)壽菊或萬(wàn)壽菊花瓣,可從中提取葉黃素。當捶擊比率不同時(shí),捶擊效率在70%-90%之間波動(dòng)。葉黃素提取量的多少取決于干燥時(shí)間的長(cháng)短;但在相同干燥時(shí)間內,700C干燥時(shí)所提取的葉黃素含量較高。
23 高速逆流色譜技術(shù)
高效液湘色譜技術(shù)(HPLC)現已被應用于色素提取工藝上。用高速逆流色譜技術(shù)[13](HSCCC)從萬(wàn)壽菊中提取葉黃素,得出最佳流動(dòng)相為:庚烷+氯仿+氰化甲烷=10+3+7(體積分數),用HPLC測定提取物中含葉黃素純度大于985%。
24 膜分離技術(shù)
采用陶瓷膜微濾(ML),對浸提液進(jìn)行精濾提純,再用反滲透膜(RO)濃縮過(guò)濾液。這種工藝以膜分離技術(shù)為主體,替代傳統乙醇提純和蒸發(fā)濃縮,工藝過(guò)程簡(jiǎn)單、色素溶液基本處于常溫操作狀態(tài),即節約能源,又保證葉黃素產(chǎn)品質(zhì)量[14]。
25 微波提取法
李建穎[15]和鄧宇[16]實(shí)驗研究了在柑橘皮和茶葉中,以微波加熱提取葉黃素的方法,探討了微波功率、提取溶劑、物料比、提取次數、提取時(shí)間、試劑顆粒大小等因素對產(chǎn)品提取率的影響,其主要影響次序為:微波功率>試劑與溶劑的物料比>提取時(shí)間。
26 萃取法
有機溶劑萃取法是提取天然色素時(shí)應用最多的方法。葉黃素的有機溶劑萃取主要受原料顆粒大小、萃取溫度、萃取時(shí)間、萃取劑的選擇和萃取劑流量的大小等因素的影響[11] [17]。
261 原料顆粒大小
原料顆粒越小,其溶解速度越快。薛永強[17]等人經(jīng)實(shí)驗得出:顆粒大小在萃取開(kāi)始階段影響較大,后期影響較小。
262 萃取溫度
在其他條件都相同時(shí),升高溫度可提高溶解效率,因而有利于收率的提高。但因萃取時(shí)采用的溶劑不同,在升高溫度時(shí)的揮發(fā)性也不同,因而應針對不同溶劑選擇適當的萃取溫度[17] [18]。
263 萃取劑的選擇
研究發(fā)現一種強極性溶劑和一種弱極性溶劑組成的二元混合溶劑對葉黃素的浸提效果要比純溶劑的浸提效果好[18]。
葉黃素在6#溶劑油、氯仿及四氫呋喃中的提取效果較好。
264 萃取時(shí)間
薛永強[17]等人報道,在其他實(shí)驗條件相同的情況下,隨著(zhù)萃取時(shí)間的延長(cháng),收率會(huì )有所提高,但收率的提高速度隨時(shí)間的延長(cháng)而下降,因此應存在最佳的提取時(shí)間。
265 萃取劑流量
在其他實(shí)驗條件相同的情況下,隨著(zhù)萃取劑流量的增大,收率提高,但達到某一數值后,收率提高速度會(huì )變慢。因此應存在最佳的提取劑流量。
27 CO2超臨界萃取法
該方法將萬(wàn)壽菊鮮花經(jīng)發(fā)酵、干燥、粉碎后做原料,用超臨界CO2以乙醇做夾帶劑萃取萬(wàn)壽菊花浸膏,將萬(wàn)壽菊花浸膏經(jīng)氫氧化鉀皂化得到水溶性天然食用色素葉黃素酯。該方法工藝簡(jiǎn)單,能耗低,對環(huán)境污染小,產(chǎn)品純度高,色調正,耐熱耐光性好,色澤穩定[19] [20]。
3 葉黃素的吸收、分布、代謝和排出
31 葉黃素的吸收
食物中的非酯化葉黃素和葉黃素酯具有相同的生物利用率,葉黃素酯要水解為非酯化葉黃素才能被人體腸道只吸收。Wingerath等在報告中指出:人體在食用葉黃素酯(含有橘子濃縮物)后,在消化后9小時(shí),血清或乳糜微粒中沒(méi)有酯。說(shuō)明在進(jìn)入淋巴循環(huán)系統之前葉黃素酯就裂解為非酯化葉黃素(Wingerath,1995)。另一個(gè)報告也指出:在按劑量30mg/d補充葉黃素酯112天之后,人體血清中可發(fā)現葉黃素單酯(可能是葉黃素甘油單棕櫚酸酯(Cranade 1998)。但是,葉黃素單酯的量?jì)H占所測得的總血清葉黃素量的3%,作者的最終結論是血清中的葉黃素可能是活體內再次酯化的結果。對于人以外的物種來(lái)說(shuō),據報告,葉黃素酯在吸收之前于雞腸中水解為游離的雙醇(Furr and Clark,1997)。
葉黃素酯水解所用酶可能是胰腺所分泌的羧酸酯水解酶,這種酶可以水解各種各樣的酯鍵(Furr and Clark,1997)。其他可能的酶為刷緣酶,據報告,這種刷緣酶具有視黃酯酶的活性(Furr and Clark,1997)。在人血中測定出了2ˊ,3ˊ-無(wú)水葉黃素,這證明了葉黃素在人體腸道內的代謝情況,研究人員認為葉黃素在酶催化下脫水形成無(wú)水葉黃素,或者在酸性催化劑的作用下直接脫水形成葉黃素酯(Furr and Clark,1997)。各種活體外研究表明葉黃素會(huì )影響β胡蘿卜素的轉化。
在使用大鼠進(jìn)行的一項攝食研究中,大鼠飼料中的非酯化葉黃素量為21-347mg/d,研究發(fā)現非酯化葉黃素的吸收率為29%-43%(Jenkins,2000)。當食用劑量為20-30mg/d時(shí),吸收率隨劑量的增加而升高,但在高劑量時(shí),吸收率會(huì )因為溶解度等因素而受到抑制(van den Berg 1999)。
(Kostic等人1995)曾報道了一個(gè)短期人體研究,發(fā)現β胡蘿卜素能夠明顯地降低葉黃素的吸收率。另一項獨立短期人類(lèi)研究(葉黃素和β胡蘿卜素一同服用)發(fā)現葉黃素會(huì )對β胡蘿卜素的吸收產(chǎn)生負面影響(van den Berg 1999,van Vlict,1998),長(cháng)期使用β胡蘿卜素補充品會(huì )明顯降低(11%)血清中的葉黃素濃度(Albanes 1997)。
葉黃素等類(lèi)胡蘿卜素、蛋黃素和玉米黃素在黃斑色素中的累積以及β胡蘿卜素在松果體和黃體中的累積說(shuō)明組織器官能夠選擇性地攝取類(lèi)胡蘿卜素(Furr and Clark,1997,van den Berg于1999對此進(jìn)行了檢查確認)。相反,如果在飲食中長(cháng)期地減少類(lèi)胡蘿卜素的量,則可觀(guān)察到血漿中的類(lèi)胡蘿卜素濃度會(huì )漫漫減少,這種情況說(shuō)明了器官中所貯存的類(lèi)胡蘿卜素會(huì )釋放到血漿中(Burri等人,2001;Furr and Clark,1997;Rock等人,1991)。
32 葉黃素的代謝
已經(jīng)在人類(lèi)的血漿中鑒定出了葉黃素的代謝產(chǎn)物。Khachik等報告飲食中的葉黃素和玉米黃素在人體內能夠代謝為6種代謝產(chǎn)物。其中4種為氧化所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物,其他2種是非酶催化的脫水產(chǎn)物(Khachik等,1995)。這些研究者提出了葉黃素在活體內可能的抗氧化作用機理。Burri等人(2001)已經(jīng)報道了成年婦女血清中的類(lèi)胡蘿卜素的代謝遵循一級動(dòng)力學(xué)規律。現在的研究發(fā)現葉黃素/玉米黃素血清半衰期為76天(Burri等人,2001)。對男性所進(jìn)行的一項早期研究也發(fā)現葉黃素/玉米黃素的半衰期為33-61天(Rock等人,1991)。還沒(méi)有發(fā)現類(lèi)胡蘿卜素通過(guò)尿排出體外,但可以通過(guò)皮脂腺和汗液來(lái)排出(Bendicb,1988)。
33 葉黃素的生物利用率
331 人類(lèi)研究概述
人類(lèi)臨床研究測定了在服用葉黃素補充品之后的血清葉黃素濃度,所報道的達到最大血清峰值濃度的時(shí)間(tmax)有很大的變化范圍,而且非酯化葉黃素或葉黃素酯補充品單次劑量所得到的AUC(濃度時(shí)間曲線(xiàn)下面積)也有很大的變化范圍。使用[13C]葉黃素示蹤物測定葉黃素在婦女體內的血漿清除率表明,葉黃素具有一定的生物利用率,且與AUC成正比(Rowland和 Tozer,1995)。當[13C]葉黃素的單次口服劑量達到3mg時(shí),研究人員所測得的血清葉黃素tmax為148小時(shí)。NHANES Ⅲ研究所調查的所有個(gè)體的數據表明葉黃素和玉米黃素的平均血清濃度為037μmol/L,有99%的人低于最大值097mol/L(CDC,1998)。這些研究所得到的結果表明葉黃素酯和非酯化葉黃素都具有相應的生物利用率。葉黃素酯在腸道內可水解為非酯化葉黃素,非酯化葉黃素然后被吸收并進(jìn)入循環(huán)系統。
331 動(dòng)物研究
嚙齒類(lèi)動(dòng)物
Park等人(1998)使用年齡為8周的雄性BALB/c小鼠研究葉黃素的吸收率。在飼料中含有005-04%的葉黃素。小鼠食用此飼料的時(shí)間為28天,測定血清、肝臟和胰腺中的葉黃素濃度。血漿葉黃素+玉米黃素的濃度在第3天達到了22-32μmol/L,可檢測到兩個(gè)最高劑量和兩個(gè)最低劑量間有明顯的差別,但這種差別在第6天就消失了,而且血清濃度在省下的研究時(shí)間內保持恒定不變(大約為25mol/L)。
犬和貓
雌性小獵犬(年齡為17-18個(gè)月,每組14只)每天補充0、1、5、10或20mg葉黃素共補充12周(Kim等人,2000)第二周時(shí),按劑量1、5或10mg/d補充葉黃素的斑貓,血漿葉黃素+玉米黃素濃度快速加大,最大濃度值分別為0005、013、016μmol/L。在試驗期間,各治療組的體重沒(méi)有差別。
預反芻小牛
用剛出生的預反芻小牛(每組5只)比較5種不同類(lèi)型的類(lèi)胡蘿卜素(包括葉黃素)在144小時(shí)內的血清濃度和脂蛋白轉運情況(Bierer等人,1995)。作為早餐的一部分,按20mg的單次口服劑量讓小牛服用溶于油中的葉黃素。葉黃素能夠比較早地達到血清峰值濃度,葉黃素在12小時(shí)后能夠達到00551μmol/L的峰值濃度,而β胡蘿卜素則需要24小時(shí)。葉黃素也能夠更快的從血清中清除。
非人靈長(cháng)類(lèi)
Snodderly和其合作者發(fā)表了松鼠猴(Saimirt sciureus,N=5,雄性)和短尾猿(Macaca fasctcularis,N=8,1只雄性和7只雌性)血清類(lèi)胡蘿卜素濃度的研究結果,松鼠猴和短尾猿的半純化飼料中含有從谷類(lèi)和苜蓿中提取的類(lèi)胡蘿卜素(Snodderly等人,1990)。猴子按12mg/d在3個(gè)月之內服用葉黃素(包括葉黃素和玉米黃素),松鼠猴和短尾猿的總葉黃素血漿濃度分別達到了052μmol/L和043μmol/L。作者認為在葉黃素和玉米黃素的使用方面,猴子更像人類(lèi),但在類(lèi)胡蘿卜素利用的某些方面與人類(lèi)相比有明顯的差別。
4 葉黃素的安全攝入量
根據美國農業(yè)部(USDA)19941996之間對人體每日食品攝入量進(jìn)行連續監測提供的數據及USDA的類(lèi)胡蘿卜素基礎數據庫計算,人體平均從飲食中攝入的葉黃素酯的量大約為12mg/d,美國葉黃素酯生產(chǎn)廠(chǎng)商Cognis公司根據這些數據給出的葉黃素酯的使用量為90%的人可攝入22mg/d。Cognis公司估算從食品補充劑中攝入的葉黃素酯的變化范圍為05-12mg/d,因此, 90%的使用者葉黃素酯的最大攝入量(普通食物和食品補充劑的攝入量的總合)大約為34mg/d。
Cognis公司的公認安全物(GRSA)小組認為葉黃素酯的安全攝入量至少可高達60mg/d,可接受葉黃素酯的保守攝入量為40mg/d。美國食品與藥品監督管理局、食品安全與營(yíng)養品應用中心、食品添加劑安全性辦公室對Cognis公司的這一結論沒(méi)有疑問(wèn)。
5 葉黃素的批準和使用現狀
含有高濃度葉黃素酯的萬(wàn)壽菊油被美國食品及藥物管理局批準為食物添加劑(21CFR§172510),可直接用作食物調味劑。萬(wàn)壽菊粉和提取物被批準為用于動(dòng)物飼料的一種著(zhù)色劑(21CFR§73295)。香料和提取物制造商協(xié)會(huì )(FEMA)已經(jīng)將萬(wàn)壽菊油(FEMA N03040)列為人用的公認安全物(GRAS),可當作食品調味劑來(lái)使用(Hall and Dser -1965)。類(lèi)胡蘿卜素(葉黃素)和萬(wàn)壽菊提取物已經(jīng)被JECFA(FAO/WHO食品添加劑聯(lián)合委員會(huì ))批準為一種沒(méi)有ADI(日允許攝入量)的食品著(zhù)色劑(JECFA,2001)。此外,ANZFA(澳大利亞新西蘭食品管理局)已經(jīng)批準葉黃素為一種GRAS(公認安全物)食品添加劑(ANZFA,2001),NZFAA(新西蘭食品保證管理局)已經(jīng)宣布了公認安全物葉黃素為動(dòng)物口服營(yíng)養物的方案(NZFAA,2001)。
目前在國外已經(jīng)有多種含葉黃素或葉黃素酯的食品補充劑上市。如美國新澤西州麥迪遜市American Home Products生產(chǎn)商生產(chǎn)的多種維生素制劑CentrumTM,營(yíng)養補充品零售商General Nutrition Centers有限公司(GNC)提供的葉黃素酯補充品Natural BrandTM EyegoldTM。
在我國,已經(jīng)有兩種含葉黃素的產(chǎn)品獲得了國家食品藥品監督管理局批準。
另外,葉黃素在醫藥、食品、飼料中都有著(zhù)廣泛的應用前景[16] [21]。
6 結論和建議
61 鑒于葉黃素及葉黃素酯在美國、澳大利亞、新西蘭等國家的批準使用情況,葉黃素及葉黃素酯可以作為食品原料使用。
62 若作為功能食品的原料,葉黃素的功能主要為抗氧化和緩解視疲勞[22,23,24]。
63 根據Cognis公司的公認安全物(GRSA)小組的結論,每日從所有食物來(lái)源中所攝取的葉黃素總量(包括酯化和非酯化葉黃素)不超過(guò)40mg葉黃素酯(或其同類(lèi)物)。
64 我國葉黃素和葉黃素酯尚未有國家質(zhì)量標準,可參考美國FDA食品法規(2001版)§73295“萬(wàn)壽菊粉和提取物”。
參考文獻
[1] Sommerburg O,Keunen JE,Bird AC,van Kuijk FJ.Fruits and vegetablea that are sources for lutein and zeaxanthin:the macular pigment in humen eyes.Br J Ophthalmol. 1998;82:907-910.
[2] Khachik F,Spangler CJ,Smith JC,et al.Identification, quantifition, and relative concentrations of carotenoids and their metabolites in human milk and serum.Anal Chem. 1997;69:1873-1881.
[3] Landrum JT.Bone RA.Lutein,zeaxanthin,and the macular pigment.Arch Biophys 2001;385:28-40
[4] Hoyer,K.(1998a)14 Day acute oral toxicitytest in rats on lutein diester oleoresin GLP31615.Lelsis Laboratory Group.St.Louis,MV
[5] Hoyer,K.(1998b) Primary eye irritation of lutein diester oleresin in rabbits. Group.St.Louis,MV
[6] Khachik,F.,Beecher,G.R.and Smith,C.J.J(1995)Lutein, lycopene, and their oxidative metabolites in chemoprevention of cancer.J.Cell.Biochem.Supp.0:236-246.
[7] Le Marchand,L.,Harchand,L.,Hankin,J.H.,Kolonel,L.N.
Beecher,G.R.,et al(1993) Intake of specific carotenoids and lungcancer risk.Cancer Epidemiol Biomarkers Prev.2:183-187.
[8] GarciaGasca,T.,Fatell,S.,VillaTrevino,S.,and Gonzalez de Mejia,E.(1998) Effect of carotenoids against genotoxicity of disthylnitrosamine on rat hepatocytes Toxicol in Vitro 12:691-698.
[9] Gonzalez de Mejia,E.,RamosGomez,M.and loarcaPina G. (1997b) Antimutagenic activity of natural xanthophy lls against aflatoxin B1 in Salmonella typhimurium Environ.Mol Mutugen.30:346-353.
[10] Bone,R.A.(2001)Florida International university,Letter to Cinty Schweizer,Cognis Corporation,Summarrizing pretiminary results from an ongoing NIHfunded humen clinical study on Xangold lutein ester consumption.
[11] 丁家興.食用天然色素葉黃素的提取 [J]甘肅科技,2003,19(7):96-98.
[12] ARMSTRONGPR,BRUSE WITZGH,STONE ML,etal.Rotary Drying for Threshing Pesals from Marigold Flower [J].Trasaction of the ASAE,2000,43(2):379-384.
[13] Yun Wei Tian you Zhang,Guoqing Xu,Yoichiro Ito.Application of CCC for the separation of lutein from a crudcextract of marigold flower petals. [J] Journal of liquid chromatography Related Technologies,2003,26(9-10),1659-1669.
[14] 許秀蘭,趙國華,等.葉黃素研究進(jìn)展[J]. 糧食與油脂,2004,10:3-7.
[15] 李建穎,鄧宇.微波提取葉黃素方法的研究[J]. 食品工業(yè)科技,2004,25(8):121-124.
[16] 楊麗飛,鄧宇.葉黃素提取工藝的初步研究[J]. 廣州食品工業(yè)科技,2004,20(1):45-47.
[17] 薛永強,王謙,李洪江.從萬(wàn)壽菊中提取葉黃素油的研究[J]. 化學(xué)工程師,2004,12:57-59.
[18] 宋昊.萬(wàn)壽菊花中葉黃素的提取[J]. 華工設計,2003, 13(4): 10-12.
[19] 馬海樂(lè ).生物資源的超臨界流體萃取[M]. 安徽科學(xué)技術(shù)出版社,2000.
[20] 周江.超臨界流體技術(shù)及其應用[J]. 熱帶農業(yè)工程,2000,(1): 13-15.
[21] 孟祥河,毛忠貴,潘秋月. 葉黃素的保健功能[J]. 中國食品添加劑,2003,(1):17-20.
[22] Barnes H.T. Formulating beverages for health eyes and skin
[J] Soft Drinks Management International,2004,25(6):27.
[23] 馬鐘錦.含葉黃素的食物對視力有益[J]. 中國食品,2000,(19):15-25.
[24] 李叢民,尹海川.卷煙焦油中自由基清除的研究[J]. 環(huán)境與健康雜志,2000,17(3):158-159.