摘要：目的比較不同抗氧化活性水果汁對老年人抗氧化功能的干預作用。方法將26名老年志愿者隨機分為蘋(píng)果汁組、石榴汁組，每天飲用指定水果汁250ml，共四周。試驗前后測定空腹外周血抗氧化活性（FRAP法）、丙二醛（MDA，硫代巴比妥酸法）水平、羰基化合物含量（DNPH比色法）、SOD（黃嘌呤氧化酶法）、GSHPx（DTNB法）、CAT活性（紫外比色法）、VC、VE、GSH、氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）含量（美國TPI公司試劑盒）、紅細胞溶血敏感性（H2O2誘導法）以及淋巴細胞DNA損傷程度（彗星試驗法），并收取晨尿，測定8OHdG（ELISA法，日本衰老控制研究所試劑盒）與肌酐含量。試驗期間進(jìn)行膳食調查一次。結果試驗期間兩組膳食營(yíng)養素攝入基本一致，石榴汁對老年志愿者抗氧化功能具有一定的改善作用，主要表現為外周血抗氧化活性的提高、血漿羰基含量的降低，其他一些指標也顯示了提高或改善的趨勢；相對而言，蘋(píng)果汁干預效果不甚明顯。結論抗氧化活性較強的水果汁具有改善衰老機體的抗氧化功能的作用。
關(guān)鍵詞：衰老；抗氧化功能；石榴；蘋(píng)果

根據我國第五次人口普查結果顯示，我國居民老齡化進(jìn)程加快，2000年我國60歲以上的人口已占人口總數的10%，到2010年，60歲以上的人口將達121%，有人形象地稱(chēng)之為“銀發(fā)浪潮”。老年人是社會(huì )寶貴的人力財富，但是，衰老往往伴隨老年性疾病發(fā)病率的升高，給社會(huì )與家庭帶來(lái)一定的醫療負擔。因此，研究老年人群的健康問(wèn)題及其干預措施將具有十分重要的理論和實(shí)踐意義。
衰老是機體不可避免的生理過(guò)程，衰老時(shí)體內發(fā)生一系列生理生化變化，其發(fā)生機制至今尚不十分清楚，許多學(xué)者為此提出了一系列學(xué)說(shuō)，其中，Harman于1956年提出的“衰老自由基學(xué)說(shuō)”到目前為止已經(jīng)得到大量研究結果的支持［1］。自由基是具有未配對電子的原子或分子的總稱(chēng)，來(lái)源于體內與體外，體內產(chǎn)生于代謝過(guò)程，體外產(chǎn)生于紫外線(xiàn)照射、吸煙、環(huán)境污染等。自由基的反應能力很強，可使細胞膜多不飽和脂肪酸發(fā)生過(guò)氧化，形成過(guò)氧化脂質(zhì)，造成生物膜損傷；自由基攻擊還可使蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子發(fā)生斷裂、修飾或交聯(lián)，產(chǎn)生蛋白質(zhì)羰基化合物以及堿基修飾物，如 8羥基鳥(niǎo)苷（8OHdG）等，從而影響生物大分子的正常生理功能。正常機體內存在酶和非酶抗氧化防御體系，酶系統包括超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSHPx）、過(guò)氧化氫酶（CAT）等，非酶系統主要指一些小分子的抗氧化劑，如維生素C、維生素E、谷胱甘肽（GSH）等。隨著(zhù)年齡的增加，體內一些抗氧化物質(zhì)含量減少，一些抗氧化酶活性下降，造成抗氧化防御體系功能的下降，導致自由基損傷隨著(zhù)年齡的增長(cháng)而加劇，從而引起衰老，并伴隨一些慢性疾病的發(fā)生、發(fā)展。有研究結果表明，生物衰老與體內SOD活性以及一些抗氧化物質(zhì)的含量呈負相關(guān)，與活性氧的生成量呈正相關(guān)；采用細胞、果蠅、線(xiàn)蟲(chóng)、小鼠、大鼠等所進(jìn)行的實(shí)驗證實(shí)一些抗氧化物質(zhì)確實(shí)能夠延長(cháng)細胞和動(dòng)物的壽命［2］。因此，尋找有效的抗氧化物質(zhì)干預衰老一直是營(yíng)養學(xué)家和老年醫學(xué)工作者孜孜不倦追求的目標之一。
近年來(lái)的一些研究結果表明，一些水果具有較強的抗氧化活性，富含許多天然抗氧化物質(zhì)［3,4,5］。我們前期的工作也揭示石榴等水果在體外具有很強的抗氧化活性［6］，動(dòng)物實(shí)驗結果表明石榴汁具有顯著(zhù)的改善老齡大鼠抗氧化功能的作用［7］。本研究以老年志愿者為干預對象，選擇抗氧化活性較低的蘋(píng)果汁為對照，進(jìn)一步觀(guān)察了石榴汁對衰老機體抗氧化功能的干預作用。
一、材料與方法
1干預對象與過(guò)程
選擇天津市某居民區退休干部、職工26名，年齡在60～70歲左右，不吸煙，無(wú)嚴重高血壓、心、肝、腎、肺疾病，在知情情況下志愿參加本試驗工作，試驗期間不服用任何抗氧化劑，不食用試驗指定以外的水果或水果汁。試驗開(kāi)始時(shí)，將志愿者隨機分入蘋(píng)果汁或石榴汁組，兩組人員的基本情況見(jiàn)表1。試驗期間，每人每天食用指定水果原汁一次，劑量為250ml，實(shí)驗周期四周。試驗所用的蘋(píng)果原汁購自于天津大湖新鮮食品果汁有限公司，石榴原汁購自于山東大紅石榴發(fā)展有限公司。

2觀(guān)察指標
試驗前后測定空腹外周血抗氧化活性（FRAP法）、丙二醛（MDA，硫代巴比妥酸法）水平、蛋白質(zhì)羰基化合物含量（DNPH比色法）、SOD（黃嘌呤氧化酶法）、GSH Px（DTNB法）、CAT活性（紫外比色法）、VC、VE、GSH、氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）含量（美國TPI公司試劑盒）、紅細胞溶血敏感性（H2O2誘導法）以及淋巴細胞DNA損傷程度（彗星試驗法）；收取晨尿，測定8OHdG與肌酐含量（ELISA法，日本衰老控制研究所試劑盒）。干預第二、三周期間，采用24小時(shí)回顧法進(jìn)行為期七天的膳食調查，其中包括一個(gè)星期六和星期天。
3統計分析
采用t檢驗（正態(tài)分布數據）或秩和檢驗（非正態(tài)分布數據）分析兩組之間和試驗前后差異的顯著(zhù)性。
二、結果
1石榴汁、蘋(píng)果汁有關(guān)抗氧化物質(zhì)含量
由表2可見(jiàn)，除了VC含量外，石榴汁主要抗氧化物質(zhì)含量均明顯高于蘋(píng)果汁。另外，石榴汁含微量的β－胡蘿卜素，蘋(píng)果汁未測出。

2兩組老年志愿者膳食營(yíng)養素攝入情況
除了維生素A兩組攝入量有一定差異外，兩組其余營(yíng)養素攝入量均較為接近。兩組脂肪、鐵的攝入量均偏高，分別達RNI的184％～190％、145％～154％；兩組維生素E、鈣攝入量均偏低，僅分別為RNI的41％～42％、63％～72％（表略）。
3血漿抗氧化物質(zhì)濃度
飲用蘋(píng)果汁、石榴汁對老年志愿者血漿VC、VE、GSH水平均無(wú)顯著(zhù)影響，兩組血漿VC水平試驗結束時(shí)較試驗開(kāi)始均有所下降，原因不明（表3）。

4血漿抗氧化活性和抗氧化酶活性
石榴汁干預后，老年志愿者血漿抗氧化活性（FRAP）顯著(zhù)升高，蘋(píng)果汁無(wú)此作用；試驗開(kāi)始或結束時(shí)兩組老年志愿者血漿SOD、GSHPx、CAT活性差異無(wú)統計學(xué)顯著(zhù)意義，兩組血漿GSHPx、CAT活性試驗結束時(shí)較試驗開(kāi)始均有所升高，原因不明（表4）。

5血漿氧化產(chǎn)物
由表5可知，兩組老年志愿者血漿血漿MDA、oxLDL含量試驗開(kāi)始或結束時(shí)差異無(wú)統計學(xué)顯著(zhù)意義，但是，MDA水平兩組試驗結束時(shí)均顯著(zhù)低于試驗開(kāi)始；另外，石榴汁對血漿羰基含量具有顯著(zhù)降低作用，而蘋(píng)果汁無(wú)顯著(zhù)作用。
6紅細胞溶血敏感性
蘋(píng)果汁、石榴汁干預后老年志愿者紅細胞溶血敏感性有所下降，但是，沒(méi)有統計顯著(zhù)性意義（表略）。

7尿8OHdG排出量與外周血淋巴細胞
DNA損傷石榴汁組尿8OHdG排出量盡管低于蘋(píng)果汁組，但是，秩和檢驗結果提示無(wú)顯著(zhù)性差異；外周血淋巴細胞DNA損傷兩組之間差異也無(wú)顯著(zhù)的統計學(xué)意義（表6）。

三、討論
成分分析結果顯示，本研究中老年志愿者飲用的石榴汁主要抗氧化物質(zhì)含量均高于蘋(píng)果汁，我們曾測定了38種水果中主要類(lèi)黃酮物質(zhì)（包括槲皮素、楊梅黃酮、坎二菲醇、芹菜配基、玉米黃酮）的含量，結果發(fā)現石榴中類(lèi)黃酮物質(zhì)含量最為豐富（另文發(fā)表）。類(lèi)黃酮物質(zhì)為多酚類(lèi)物質(zhì)家族中重要成員之一，有關(guān)類(lèi)黃酮物質(zhì)的抗氧化作用已有大量報道，一些類(lèi)黃酮物質(zhì)如槲皮素體外的抗氧化作用顯著(zhù)強于VC或VE［8］。有些學(xué)者進(jìn)行了類(lèi)黃酮物質(zhì)抗衰老作用的研究，并取得了令人鼓舞的結果，如Rai等的實(shí)驗證明給予一定量的富含類(lèi)黃酮物質(zhì)的提取物有助于提高老齡機體抗氧化保護功能，并能顯著(zhù)改善認知能力［9］；Oyama的研究小組發(fā)現類(lèi)黃酮物質(zhì)楊梅黃酮和槲皮素能夠有效減輕衰老機體腦神經(jīng)元的氧化損傷，從而減緩阿而茨海默氏病的進(jìn)程［10］；Smith等在一次老年人群實(shí)驗中發(fā)現補充富含類(lèi)黃酮物質(zhì)的蔬菜水果提取物膠囊80天后，老年人外周血淋巴細胞DNA損傷顯著(zhù)減輕［11］，Salah等的研究也得到了類(lèi)似的結果［12］。
我們前期的動(dòng)物試驗也取得了令人鼓舞的結果，與抗氧化活性較弱的蘋(píng)果汁相比，石榴汁具有顯著(zhù)提高老齡大鼠血清抗氧化活性，而且對蛋白質(zhì)、淋巴細胞DNA以及LDL等生物大分子均有較好的保護作用［7］。本研究結果表明，老年人連續飲用石榴汁四周后，機體抗氧化功能得到了一定程度的改善，主要表現為外周血抗氧化活性的提高、血漿羰基含量的降低，其他一些指標也顯示了提高或改善的趨勢，如果延長(cháng)干預時(shí)間，效果可能更為明顯。相對而言，蘋(píng)果汁改善老年機體抗氧化功能的效果不是十分明顯。
由于石榴汁富含多酚類(lèi)物質(zhì)，而且石榴汁干預后老年志愿者血漿VC、VE、GSH水平均無(wú)顯著(zhù)變化，因此，石榴汁中多酚類(lèi)物質(zhì)可能是其中主要的功能性抗氧化活性物質(zhì)。我們認為有目的地增加抗氧化活性較強水果的攝入，特別是富含多酚類(lèi)的水果，有可能通過(guò)改善機體抗氧化功能，達到延緩衰老和預防慢性疾病發(fā)生、發(fā)展的目的。
參考文獻
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