詹美蓉 許榕仙

（福建醫科大學(xué)營(yíng)養與保健醫學(xué)系，福州，350004）

 

摘要：目的探討葉酸、VitB6、VitB12與2型糖尿病患者同型半胱氨酸（Hcy）水平的關(guān)系。方法應用熒光偏振免疫分析法測定99例糖尿病患者和31例正常人的Hcy，并同時(shí)測定糖尿病患者的葉酸、維生素B12。結果2型糖尿病患者的Hcy水平顯著(zhù)高對正常對照組（10.85±6.78，8.97±3.46，P＜0.05）；葉酸（5mg/d）干預組，VitB12(1.5mg/d)干預組及葉酸（5mg/d）與VitB12(1.5mg/d)聯(lián)合干預組可降低糖尿病患者血中Hcy水平，VitB6(90mg/d)干預組則無(wú)此作用。結論葉酸干預組、VitB12干預組、葉酸聯(lián)合VitB12干預組可降低糖尿病患者血中Hcy水平。

 

同型半胱氨酸（Hcy）是一種含硫氨基酸，是蛋氨酸代謝過(guò)程中的重要中間產(chǎn)物，葉酸、VitB6、VitB12是蛋氨酸代謝過(guò)程中的輔酶，葉酸、VitB6、VitB12缺乏可使血清同型半胱氨酸水平增高。近年來(lái)研究表明，適當補充葉酸、VitB6、VitB12等B族維生素可以使糖尿病患者的血漿同型半胱氨酸水平降低。為此，我們通過(guò)使用葉酸、VitB6、VitB12對糖尿病患者進(jìn)行干預，觀(guān)察其對糖尿病患者同型半胱氨酸水平的影響。

 

1 研究對象與方法

1.1 研究對象

糖尿病患者均選自2005年11月～2006年11月在福建醫科大學(xué)附屬第一醫院內分泌科住院或專(zhuān)科門(mén)診的2型糖尿病患者。糖尿病診斷依據1985年WHO糖尿病診斷與分型標準。一共99例，男50例，女49例，年齡29～67歲，平均年齡54.25±11.00歲，平均病程3.75±0.66年。入選對象排除合并肝功能或甲狀腺功能異常、DN以外的泌尿系疾病、慢性腹瀉，乳腺癌、卵巢癌、急性淋巴細胞性白血病、1型糖尿病、心血管病變、甲狀腺機能減退癥和惡性貧血等；每天抽煙＞5支；近3個(gè)月內曾應用葉酸、維生素B6和維生素B12；近3個(gè)月內曾應用氨甲蝶呤、雌激素、避孕藥、NO、苯妥英鈉、卡馬西平等。

正常對照來(lái)自醫院健康體檢人群，共31例。年齡、性別構成、體質(zhì)指數與糖尿病組相似，空腹血糖及餐后2小時(shí)血糖均正常，其中男13例，女18例，年齡42～75歲，平均年齡55.33±11.03歲。近3個(gè)月內未曾服用葉酸、維生素B6和維生素B12。

 

1.2 研究方法

干預干預方法：把糖尿病患者按年齡、性別、病程分為5組。第1組不施加干預措施；第二組給予葉酸，每天5mg；第三組給予維生素B6，每天90mg；第四組給予維生素B12，每天1.5mg；第五組給予葉酸和維生素B12聯(lián)合干預，葉酸5mg/天，維生素B12為1.5mg/天。各組干預時(shí)間均為8周。

檢測方法：受試者過(guò)夜禁食12小時(shí)，次晨空腹采靜脈血3ml，2個(gè)小時(shí)內分離血清，并置-20℃低溫冰箱中保存。同型半胱氨酸測定采用熒光偏振免疫分析法，（雅培公司的AXSYM系統，試劑來(lái)自于美國雅培公司）。葉酸、維生素B12測定使用gama計數儀，采用雙標記放免法，試劑盒購于天津協(xié)和醫藥試劑公司。測定批內變異和批間變異分別為1.07%和2.61%，空腹血糖、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白均使用醫院檢驗科生化自動(dòng)分析儀測定。

 

1.3 統計分析方法

指標檢測結果以x-±s表示，正態(tài)分布資料組間比較采用獨立樣本T檢驗、方差分析，非正態(tài)分布資料組間比較采用秩和檢驗。上述統計均用SPSS11.5軟件進(jìn)行計算，以a=0.05作為檢驗水準。

 

2 結果

2.1 糖尿病組與正常對照組的基本情況

由表1可知，糖尿病各組與對照組相比，年齡（AGE）、性別（SEX）、膽固醇(TC)、低密度脂蛋白（LDL）均無(wú)明顯差別，收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白（HDL）均高于對照組，血漿Hcy水平亦明顯高于對照組。

高Hcy血癥的界定以正常對照組的Hcy均值加2倍的標準差構成，本研究中以Hcy＞15.0umol/L作為Hcy升高的標準。在本次研究中，正常對照組的高Hcy血癥發(fā)生率為9.52%，糖尿病組的高Hcy血癥發(fā)生率為22.40%。

表1糖尿病組與正常對照組的一般臨床特征

 

 

表2糖尿病不同干預組的一般臨床特征

Table 2Clinical Data of different group DM Subjects

 

2.2 糖尿病各干預組葉酸、維生素B12與Hcy水平比較

把糖尿病患者隨機分為5組，由表2可知，這5組的年齡、病程均無(wú)明顯差別。由表3可知，糖尿病無(wú)干預組及使用維生素B6干預組，血漿葉酸、Hcy、維生素B12水平在干預前后均無(wú)明顯差別。葉酸干預組，干預后患者的血漿葉酸水平有所提高，同型半胱氨酸水平有所下降，并有顯著(zhù)性差異，維生素B12水平無(wú)差別；維生素B12干預組，干預后患者的血漿維生素B12水平上升，同型半胱氨酸水平下降，均有顯著(zhù)性差異，血漿葉酸水平則無(wú)明顯差別；葉酸聯(lián)合維生素B12干預組，干預后患者的血漿葉酸與維生素B12水平均上升，同型半胱氨酸水平下降，并均有顯著(zhù)性的差異。

 

表3糖尿病各干預組血漿葉酸、B6、B12水平

Table 3Content of Folate,VitB12，Hcy in DM Experimental Group

 

 

2.3 干預前后各組葉酸、VitB12、Hcy差值的比較

 

為了分析各組干預前后葉酸、VitB12、Hcy水平的變化，把各組干預前水平減去相應的干預后水平所得的差值（d）進(jìn)行方差分析（表4）。結果顯示：各組葉酸、VitB12、Hcy的差值都有顯著(zhù)性差異，進(jìn)一步作兩兩比較(q檢驗)，發(fā)現未干預組、葉酸干預組葉酸、VitB12差值與其它各組有差別，未干預組、維生素B6干預療組的Hcy差值與其它各組有差別。

 

 

表4各組葉酸、VitB12、Hcy差值比較

Table 4Difference Content of Folate,VitB12，Hcy in DM Experimental Group

 

3 討論

Hcy是含硫氨基酸代謝過(guò)程中的一個(gè)重要中間產(chǎn)物，人體主要通過(guò)2條途徑來(lái)調節其代謝。第1條是Hcy接受N一甲基四氫葉酸提供的甲基，重新生成甲硫氨酸，催化此反應的酶稱(chēng)為甲硫氨酸合成酶，其輔助因子是Vit B12，此反應是目前已知體內能利用N一甲基四氫葉酸的惟一反應，而體內葉酸的貯存形式是N一甲基四氫葉酸；第2條途徑是Hcy可在胱硫醚B合成酶的催化下，與絲氨酸縮合生成胱硫醚，而胱硫醚B合成酶的輔助因子是磷酸吡哆醛，含有VitB6。從以上Hcy的代謝中可知VitB12、葉酸、VitB6均與Hcy的代謝有關(guān)。國內外很多研究報道認為2種B族維生素聯(lián)用可顯著(zhù)降低Hcy的濃度。本研究通過(guò)采用3種維生素單用及聯(lián)合運用，探討其降低Hcy水平的效果。

1994年,Franken等[1]對21例高Hcy血癥患者用葉酸(5mg/d)和維生素B6(250mg/d)進(jìn)行干預，6周后血漿Hcy濃度全部恢復正常。Lobo等[2]將95例患者分為4組，每日分別給予葉酸0.4mg、1mg、5mg及安慰劑干預，服用葉酸的患者同時(shí)給予VitB12(0.5mg/d)和VitB6(12.5mg/d)，6周后除安慰劑組血漿Hcy濃度無(wú)明顯變化外,其余3組血漿Hcy濃度均明顯降低,且3組之間降低程度無(wú)顯著(zhù)差異。

本研究中，葉酸（5mg/d）組，VitB6(90mg/d)組，VitB12(1.5mg/d)組及葉酸（5mg/d）加VitB12(1.5mg/d)聯(lián)合用藥組，除了VitB6組干預后血漿Hcy濃度無(wú)明顯變化外，其余3組的血漿Hcy濃度均明顯降低。提示除VitB6外，其余均可降低糖尿病患者血中的Hcy水平。

Mark等[3]認為，降低空腹Hcy主要依靠葉酸，VitB12有輕度作用，而VitB6則無(wú)作用。本研究中，維生素B6干預組干預前后的葉酸、VitB12及Hcy水平均無(wú)明顯變化，提示單獨運用維生素B6進(jìn)行干預對降低同型半胱氨酸無(wú)作用，與上述結果一致。提示以后在同型半胱血癥的干預中，可不用維生素B6。Sturat[4]的meta分析亦表明，相對葉酸、VitB6、VitB12等B族維生素而言，葉酸降低血漿Hcy的能力最強，葉酸與VitB12有較弱的聯(lián)合作用。在本次研究中，葉酸與VitB12聯(lián)合運用雖可降低患者血漿的Hcy水平，但在聯(lián)合干預中，雖然患者血漿的Hcy水平干預前后差值較大，卻沒(méi)有顯著(zhù)性的差異，可能與本研究中病例數不夠大有關(guān)系。

Lobo等[2]研究提示，每日給予0.4mg葉酸的同時(shí)合用維生素B12、B6，可能會(huì )收到與服用大劑量葉酸相同效果。目前，對葉酸的用量也有小劑量的趨勢。本次研究中，對各干預組的維生素使用劑量沒(méi)有進(jìn)一步細分，希望在以后的研究中可以更加深入。雖然VitB12和葉酸的干預對臨床降低和消除高Hcy血癥是迅速有效的，但是，補充維生素后的遠期效果如何，停藥后有無(wú)反復及能否預防由高同型半胱氨酸血癥引起的血管性疾病，尚需進(jìn)一步研究。

 

參考文獻

[1] Franken DG, Boers GH, Blom HJ, et al. Treatment of mild hyperhomocysteinemia in vascular disease patients[J]. Arterioscler Thromb, 1994, 14(3):465-470.

[2] Lobo A, Naso A, Arheart K, et al. Reduction of homocysteine levels in coronary artery disease by low2 dose folic acid combined with Vitamins B6 and B12[J]. AmJ Cardiol, 1999, 83(6):821-825.

[3] Laszlo Mark,Effect of Treatment with folic acid and VitaminB6 on lipid and Homocysteine Concentration in patients with Coronary Artery Disease[J]. Nutrition, 2002,18(5):428-429.

[4] Stuart J, Bishop D, Wald NJ, et al. Folate,homocysteine,endothelial function and cardiovascular[J].The Journal of Nutritional Biochemisty, 2004,15:64-79.