達能營(yíng)養中心第十屆學(xué)術(shù)研討會(huì )論文集
彭詠梅
(復旦大學(xué)附屬兒科醫院，上海，200032)
研究目的
研究?jì)山M不同進(jìn)食模式的母親，其必需脂肪酸通過(guò)母乳乳汁對嬰兒出生后不同階段的血液、生長(cháng)發(fā)育的影響。
具體目標
調查不同膳食模式地區、不同階段人乳中必需脂肪酸的濃度差異。
比較不同膳食模式地區小兒血漿磷脂脂肪酸濃度差異及隨母乳變化而變化的趨勢。
檢測母乳中脂肪酸與小兒血漿磷脂脂肪酸濃度的相關(guān)性。
觀(guān)察不同脂肪酸膳食模式地區母乳對小兒生長(cháng)發(fā)育的影響。
研究背景
2002－2004年中國全國營(yíng)養調查顯示，代謝綜合癥可影響1/4-1/5的個(gè)體。這些疾病病因復雜，母親膳食中常量營(yíng)養素的不足或不平衡對子代的長(cháng)期影響，似乎與人類(lèi)的上述疾病有密切關(guān)系。有報道指出，與人工喂養相比，母乳喂養人群的高血壓，2型糖尿病和肥胖[4]的發(fā)生率低。之所以如此，在于母乳的成分具有潛在的保護作用機制，如多種生物活性物質(zhì)，以及必需脂肪酸（EFA）等。
人體內不能合成EFA，只能從食物中獲得。因此純母乳喂養嬰兒其組織中LCPUFA的含量取決于母乳成分；而母乳中LCPUFA的含量則部分反映出母親膳食脂肪酸的組成。所以，胎兒和嬰兒要獲得足量的EFA和LCPUFA，取決于充足廣譜的母親膳食。人群研究顯示：母親的膳食習慣與母乳中脂肪酸組成相關(guān)，喜食河、海魚(yú)，植物油，綠葉植物以及高脂水果的母親其母乳中含有較高的n6與n3多不飽和脂肪酸（PUFA）。Xiang M等的研究也表明：中國母親攝入的LA（n6）較瑞典母親高而EPA與DHA(n3)則低，從而使其母親乳汁中的脂肪酸組成也出現相同的變化。
膳食中LCPUFA的成分比例，如n6/n3 PUFAs的比例非常重要，因為n6和n3 PUFA之間具競爭代謝，它們具有不同的功能作用。在動(dòng)物研究，母乳中不同的n6/n3 PUFAs比例，可以引起神經(jīng)系統和視網(wǎng)膜發(fā)育、免疫反應性、免疫耐受和體格生長(cháng)速率的不同變化。這種功能提示母乳中n6/n3 PUFAs的比例可能影響圍產(chǎn)期的新陳代謝，導致成年期病理狀況的發(fā)生。
雖然最優(yōu)的n6/n3 PUFAs比例至今仍然不清，但古生物時(shí)代的比例接近于1。人類(lèi)學(xué)與流行病學(xué)在分子水平的調查都顯示人類(lèi)是從n6/n3 PUFAs比例接近于1的飲食中進(jìn)化而來(lái)的，而現在西方化飲食中的n6/n3 PUFAs比例為15/1到16.7/1，表明與人類(lèi)進(jìn)化及已建立的基因膳食模式相比，西方化飲食缺乏n3PUFA。過(guò)去50年發(fā)達國家膳食中n6 PUFAs消費增加和n3 PUFAs下降引起人乳中n6 PUFAs的上升和n3 PUFAs水平的下降。歐洲國家人初乳中n6/n3 PUFAs的比例在5到15之間不等。此外，商業(yè)化的嬰兒奶粉的n6/n3 PUFAs在8-9。
隨著(zhù)必需脂肪酸中n6/n3PUFAs比例的上升，西方社會(huì )肥胖、糖尿病、過(guò)敏和心血管疾病（CVD）也隨之增加，兩者之間有顯著(zhù)的關(guān)系。而增加膳食中n3 PUFA的量，可降低心血管疾病的危險性。動(dòng)物研究發(fā)現n3 PUFA在調節能量平衡和預防胰島素抵抗中起著(zhù)關(guān)鍵作用。此外，許多慢性疾病如冠心病和2型糖尿病在居住于北極的愛(ài)斯基摩（Inuit）人群中很少見(jiàn)，這種人群傳統上消費大量的富含n3 PUFAs的海產(chǎn)品，可使血漿具有低n6/n3 PUFA比例（3∶1），乳汁中含有高濃度的n3 PUFAs。
有研究報道出生后頭9周n3 PUFAs缺乏將導致成年鼠血壓升高；還可以導致子代的空腹血糖水平升高。這個(gè)結果提示圍產(chǎn)期PUFA攝入不平衡可能決定酶的活動(dòng)/或基因的表達，并可能維持到成年期，影響代謝程序，導致成年期疾病發(fā)生；或者干擾免疫功能，如過(guò)敏和食物不耐受等。
但至今很少有研究報道早期膳食PUFA含量變化對新陳代謝的長(cháng)期影響。目前對生命早期中EFA總量，或最佳的n6/n3EFA比例的需求及其長(cháng)期結果的影響均知之甚少。
本課題合作者已經(jīng)就以下方面對母乳中EFA對子代的長(cháng)期影響作了詳盡的動(dòng)物實(shí)驗研究：發(fā)現：
1.孕期及哺乳期母鼠膳食中n6∶n3的不同含量（n6/n3分別為0.4，9和216）可調節新生鼠的Leptin水平。
2.母鼠膳食增加n3 LCPUFA導致新生鼠生長(cháng)速率、脂肪組織塊及血清Leptin水平的降低。
3.膳食中一定比例的n6/n3 PUFAs與子代的體重增加、腹股溝白色脂肪的生長(cháng)及脂肪細胞大小的增加有關(guān)。
4.圍產(chǎn)期特殊比例的n6/n3 PUFAs膳食的攝入可能對子代鼠到達成年時(shí)的生理參數有長(cháng)期的影響，n6/n3比例為9可能與成年雄性和雌性小鼠的食物攝入增加、體重增加、空腹胰島素水平增加有關(guān)，此外，還可提高成年雄性鼠的心臟收縮壓。
如果能夠在將來(lái)的人類(lèi)研究中驗證以上動(dòng)物實(shí)驗中的某些關(guān)系和結果，則可以通過(guò)孕期或哺乳期的母親膳食攝入模式的干預和管理來(lái)阻抑這些疾病的迅速增加，而不是運用價(jià)格昂貴的藥物干預。
研究?jì)热?/STRONG>
1.選取不同膳食模式的兩個(gè)地區，一個(gè)為膳食取向以普通中國南方膳食模式為主，另一個(gè)地區以海洋食品膳食模式為主。調查分別采集孕中后期及哺乳期母親7天的膳食狀況。在嬰兒出生后，每地各選2組嬰兒，每組100名正常出生體重小兒（出生體重≥2500克）作為研究對象。齊同各組年齡、性別、父母社會(huì )經(jīng)濟狀況。對嬰兒及母親的一般狀況及家庭的社會(huì )、經(jīng)濟、文化情況進(jìn)行問(wèn)卷調查。
2.評價(jià)不同膳食模式地區、不同階段人乳中必需脂肪酸的濃度差異。
3.比較不同膳食模式地區小兒血漿磷脂脂肪酸濃度差異及隨母乳變化而變化的趨勢。
4.檢測母乳中脂肪酸與小兒血漿磷脂脂肪酸濃度的相關(guān)性。
5.觀(guān)察不同膳食模式地區母乳中脂肪酸及小兒血漿磷脂脂肪酸濃度對小兒生長(cháng)發(fā)育的影響。
實(shí)施方法
1.項目研究地區及對象的選取
選取不同膳食模式的兩個(gè)地區，計劃選擇江蘇省常州市（CZ）和浙江省溫州市（WZ），當地的膳食主要取向分別以普通中國南方膳食和海產(chǎn)品為主。
選取兩地樣本醫院一年內的所有孕婦為對象，母親入組標準：健康母親；年齡19－35歲；單卵單生。
在嬰兒出生后，每地各選足月適齡嬰兒100名（見(jiàn)圖4），出生體重（BW）≥2500克，≤4000克為研究對象。排除窒息、感染和畸形小兒，同時(shí)齊同兩地小兒的年齡、性別、父母社會(huì )經(jīng)濟狀況及母親的一般狀況，通過(guò)問(wèn)卷調查獲得。各入組對象需在入組前簽署知情同意書(shū)，以便配合之后的隨訪(fǎng)工作。
由于研究?jì)H為觀(guān)察研究，沒(méi)有采取干預措施，所以不需要采取隨機化原則。
2.孕母膳食調查
為了解孕母和乳母膳食狀況對小兒PUFA的影響，分別在孕后期及哺乳期對母親進(jìn)行膳食調查，記錄7天內母親的膳食攝入情況。
3.小兒體格及認知發(fā)育隨訪(fǎng)
從0－12月，將對小兒的體格和認知發(fā)育進(jìn)行隨訪(fǎng)，隨訪(fǎng)間隔時(shí)間為：5天，42天，12月。體格發(fā)育指標為：體重、身高、頭圍、胸圍。認知發(fā)育指標：在12月時(shí)進(jìn)行Gesell1發(fā)育診斷法測試，計算發(fā)育商（DQ）。
4.乳汁檢測
收集內陸食品組和海洋食品組哺乳期母親各100例，采集初乳和成熟期乳汁各3－5ml，檢測其中必需脂肪酸水平。
5.血液檢測
收集臍血和5天及42天，12月血清1－3ml不等，檢測脂肪酸濃度、脂肪相關(guān)指標lptin等。
6.實(shí)驗室分析方法
6.1脂肪酸分析：脂肪酸甲酯通過(guò)毛細液氣色譜技術(shù)，在Hewlett－Packard 6890氣相色譜儀上進(jìn)行分離。
6.2 Leptin分析：Leptin濃度通過(guò)放射免疫法測量（RIA；Linco Research Ltd., St. Charles, MO, U.S.A.），運用標準添加程序計算Leptin值。
6.3其他指標分析：磷脂、甘油三脂、膽固醇等分析：按臨床常規檢測。
6.4標本收集及轉運：血樣及乳汁樣本放于-70℃凍存；從溫州、常州轉運到上海，再從上海轉運到瑞典哥德堡大學(xué)脂肪實(shí)驗室。
7.統計分析
擬用SPSS和STATA軟件進(jìn)行分析。在對兩地區5天母乳、臍血、小兒5天血漿磷脂脂肪酸進(jìn)行比較時(shí)，采用方差不齊的t檢驗；在對常州地區5天母乳及42天母乳脂肪酸進(jìn)行比較時(shí)，采用非參數檢驗方法Wilcoxon Signed Rank Test；在對常州地區臍血、5天及42天血漿磷脂脂肪酸進(jìn)行比較時(shí)，采用方差分析Oneway ANOVA Test，對3個(gè)時(shí)點(diǎn)之間兩兩比較采用Post Hoc Test；在對兩地區5天母乳與小兒5天血漿磷脂脂肪酸之間，以及常州地區42天母乳脂肪酸及小兒42天血漿磷脂脂肪酸之間進(jìn)行相關(guān)性分析時(shí)，采用Pearson correlation相關(guān)分析。
研究結果與分析
1被調查者基本情況
1.1兩地母親基本資料比較，見(jiàn)表1、表2。
表1兩地母親基本資料比較
表2兩地小兒基本資料比較
常州及溫州兩地孕母的年齡、體重、身高、BMI以及分娩方式均無(wú)明顯差異。
1.2兩地小兒基本資料比較
常州及溫州小兒的胎齡、男女胎兒數、出生體重及出生身長(cháng)均無(wú)明顯差異。
2不同膳食模式地區母初乳中脂肪酸濃度
差異比較
2.1WZ和CZ母初乳脂肪酸濃度比較。見(jiàn)表3，圖1，圖2。
2.1.1飽和脂肪酸：除C18∶0溫州＞常州母初乳外，其余飽和脂肪酸兩地未見(jiàn)差異。但WZ組SFA＞CZ組。
2.1.2單不飽和脂肪酸：兩地多數未見(jiàn)明顯差異，只有18∶1 n9，溫州明顯高于常州。但WZ組MUFA＞CZ組。
2.1.3多不飽和脂肪酸：CZ地區母初乳中亞油酸（P＜0.001）和n6（P＜0.001）、α亞麻酸（P＜0.001）及n3（P＜0.05）均明顯高于WZ地區；而WZ地區母初乳中的EPA（P＜0.05）和DHA（P＜0.05）以及EPA+DHA濃度明顯高于CZ組母初乳。
2.2CZ和WZ母初乳n6/n3PUFA比例，見(jiàn)表3。
表3兩地區5天母乳脂肪酸比較
從表3中可見(jiàn)，兩地母初乳中n6/n3PUFAs比例沒(méi)有明顯差異（CZ 15.62±4.98，WZ 14.44±4.67，P＞0.05）。
3不同膳食模式地區小兒血漿磷脂脂肪酸濃度差異
3.1兩地區臍血血漿磷脂脂肪酸比較，見(jiàn)表4。
表4兩地區臍血血漿磷脂脂肪酸比較
續表4
3.1.1飽和脂肪酸：小兒臍血中除C18∶0溫州＞常州母外，其余飽和脂肪酸兩地未見(jiàn)差異。WZ組SFA＞CZ組。
3.1.2單不飽和脂肪酸：兩地多數未見(jiàn)明顯差異，僅有18∶1 n9，溫州明顯高于常州。WZ組MUFA＞CZ組。
3.1.3多不飽和脂肪酸：CZ地區小兒臍血中亞油酸（P＜0.001）和n6（P＜0.001）、20∶4 n6（P＜0.001）、α亞麻酸（P＜0.01）、PUFA（P＜0.001）及不飽和指數USI（P＜0.01）均明顯高于WZ地區；而WZ地區小兒臍血中的EPA（P＜0.01）濃度明顯高于CZ組臍血。見(jiàn)圖3，圖4。
圖3兩地小兒臍血EPA比較, 圖4兩地臍血血漿磷脂脂肪酸比較
3.2兩地區臍血血漿磷脂脂肪酸中AA/DHA以及n6/n-3比較。
CZ組臍血AA/DHA為3.39±0.83，明顯高于WZ組臍血2.81±0.73（P＜0.01）。
CZ組臍血n6/n3為6.13±1.50，明顯高于WZ組臍血5.02±1.34（P＜0.01）。
3.3.兩地區小兒5天血漿磷脂脂肪酸比較，見(jiàn)表5。
3.3.1飽和脂肪酸：小兒5天血中以下飽和脂肪酸溫州＞常州（12∶0、18∶0、20∶0、22∶0，P＜0.01）。WZ組SFA＞CZ組。
3.3.2單不飽和脂肪酸：兩地小兒5天血均未見(jiàn)明顯差異。
3.3.3多不飽和脂肪酸：CZ地區小兒5天血中20∶2 n6、花生四烯酸n6和n6均明顯高于WZ組（P＜0.001）。其余多不飽和脂肪酸兩地5天血未見(jiàn)明顯差異。見(jiàn)圖5。
AA/DHA、PUFA和USI均為CZ明顯高于WZ地區（P＜0.01）。
表5兩地區小兒5天血漿磷脂脂肪酸比較
